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RNase R
來源: | 作者:geneseed | 發布時間: 2018-03-29 | 13675 次瀏覽 | 分享到:



Ribonuclease R (RNase R)

貨號

試劑

規格

保存條件

R0301

RNase R (20U/μL)

500 U

-20

10X Reaction Buffer

1 mL


RNase R
 (Ribonuclease R)是一種來源于大腸桿菌RNR 超家族的 3’-5’核糖核酸外切酶,可從 3’-5’方向 RNA 逐步切割成二核苷酸和三核苷酸。RNase R 可消化幾乎所有的線性 RNA 分子,但不易消化環形RNA、套索結構或 3’突出末端少于 7 個核苷酸的雙鏈 RNA 分子。RNase R 常用于基因表達和可變剪切研究,可消化線性 RNA 以使環形 RNA (circRNAs)或套索結構 RNA (lariat RNA)得到富集。







產品組分:

Storage Buffer

50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1%

Triton? X-100, 50% Glycerol

10X Reaction Buffer

200 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 M KCl, 1 mM MgCl2


單位定義
標準反應體系下,于 37℃,10 min 1 μg poly(A)轉化成酸溶核苷酸所需的酶量定義為一個活力單位(U)。


反應體系

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 0.1 mM MgCl2, 37℃孵育。

注:1RNase R 0.1-0.5 mM Mg2+存在時活性最高,反應中 EDTA 可能降低 RNase R 活性,此時可額外添加 MgCl2 使 Mg2+ 濃度最高達到 0.5 mM。2孵育后可于 70℃,10 min 使酶失活,再進行下游實驗如逆轉錄;也可不滅活,直接純化后進行下游實驗。


質量
控制:
SDS-PAGE 檢測純度>99%;Total RNA RNase R 消化后進行 RT-qPCR 檢測,線性 RNA 豐度明顯降低, 環形RNA 豐度基本不變。



參考文獻:
1. Cheng ZF, Deutscher MP. J. Biol. Chem. 2002; 277:21624–21629.
2.Suzuki H et al.. Nucleic Acids Res. 2006; 34(8), e63.
3.     3.Vincent HA, Deutscher MP. J Biol Chem. 2006 Oct 6; 281(40):29769-75.




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